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本期《袁來如此》為系列文章《大分子生物分析概論》的第十三篇，旨在根據(jù)已發(fā)表的文獻(xiàn)資料，對(duì)評(píng)估藥物臨床前PK/PD時(shí)，開發(fā)和選擇LBA方法的策略作初步介紹。 由于內(nèi)容篇幅較長，本文將采取上下篇形式進(jìn)行推送，敬請(qǐng)垂注！《袁來如此》專欄系廣州博濟(jì)醫(yī)藥微信公眾號(hào)打造的科普學(xué)術(shù)專欄，內(nèi)容均為博濟(jì)醫(yī)藥子公司深圳博瑞副總經(jīng)理袁智博士原創(chuàng)。1.導(dǎo)論 藥物發(fā)現(xiàn)是一個(gè)快速的transformative的過程，其包括靶標(biāo)識(shí)別、靶標(biāo)驗(yàn)證、先導(dǎo)藥物的識(shí)別和優(yōu)化。隨著項(xiàng)目推進(jìn)經(jīng)過這些階段，對(duì)生物分析的需求也在相應(yīng)地改變。開發(fā)合適的生物分析方法可以提供藥代動(dòng)力學(xué)和藥效動(dòng)力學(xué)（PK/PD）的寶貴數(shù)據(jù)，以支持在新藥研發(fā)項(xiàng)目不同階段中關(guān)鍵的藥效和安全性研究，從而為項(xiàng)目的進(jìn)展奠定堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)。在新藥早期的發(fā)現(xiàn)階段，會(huì)同時(shí)考慮不同藥物模式（drug modalities）的多個(gè)分子。一般有多種模式可供選擇，取決于靶標(biāo)及其位置，例如，傳統(tǒng)的小分子、多肽、單克隆抗體、抗體-藥物偶聯(lián)物、納米抗體、融合蛋白藥物、雙特異性生物藥和寡核苷酸。在生物技術(shù)產(chǎn)業(yè)中，藥物的快速發(fā)現(xiàn)以及快速開發(fā)正推動(dòng)著生物分析領(lǐng)域的發(fā)展和演進(jìn)。這種演進(jìn)的主要內(nèi)容是，縮短分析運(yùn)行時(shí)間，實(shí)施multiplex分析，提高靈敏度，降低樣品體積的消耗，實(shí)現(xiàn)分析測試的自動(dòng)化。 本文關(guān)注的重點(diǎn)是臨床前蛋白藥物生物分析方法的開發(fā)策略，即LBA分析平臺(tái)的選擇和方法開發(fā)中的關(guān)鍵注意事項(xiàng)。本系列之前的文章，基本是關(guān)注用于臨床樣本分析的LBA方法。為了簡單起見，在此文中僅評(píng)估用于檢測蛋白藥物的sandwich format的LBA，而蛋白藥物在大多數(shù)情況下，意味著單克隆抗體。雖然相關(guān)技術(shù)有多方面的進(jìn)步，本文將重點(diǎn)關(guān)注已經(jīng)商業(yè)化和在生物分析行業(yè)十分流行的技術(shù)。文末的參考可以引導(dǎo)讀者非常詳細(xì)地了解相關(guān)內(nèi)容。 目前最流行的3種技術(shù)是ELISA、電化學(xué)發(fā)光（ECL、MSD、NJ、USA）和Gyrolab®（Gyros Protein Technologies、Uppsala、Sweden）。 同時(shí)，本文會(huì)簡要地涵蓋以下幾項(xiàng)不經(jīng)常使用但具有超高靈敏度的技術(shù)：如基于Single Molecule Array平臺(tái)（單分子陣列，Simoa™），單分子計(jì)數(shù)[SMC™]的Erenna® 平臺(tái)（Singulex Inc、CA、USA），免疫聚合酶鏈反應(yīng)平臺(tái)（immuno-polymerase chain reaction、immuno-PCR、 Imperacer®、Chimera Biotec GmbH、Dortmund、Germany）。另外，還會(huì)簡要介紹multiplexing的Luminex平臺(tái)（Luminex xMAPR、Luminex Corporation、TX、USA）。在藥物發(fā)現(xiàn)階段，分析方法開發(fā)是生物分析的主要內(nèi)容之一，同時(shí)，應(yīng)當(dāng)特別考慮評(píng)估耐受性（tolerance）和分子完整性（molecular integrity）。2.臨床前LBA方法的關(guān)鍵參數(shù) 用于藥物發(fā)現(xiàn)階段的生物分析方法有5個(gè)重要參數(shù)：樣品體積要求，定量的動(dòng)態(tài)范圍，測試運(yùn)行時(shí)間，靈敏度和自動(dòng)化程度。本文將簡要地評(píng)估這些參數(shù)，并介紹這些參數(shù)在選擇檢測平臺(tái)時(shí)發(fā)揮的重要作用。 1) 樣本體積消耗 從小鼠身上單次采集的血清或血漿樣本的體積約為50ml。隨著在動(dòng)物研究中嘗試實(shí)施3R（替換replacement，減少reduction 和細(xì)化refinement ），生物分析業(yè)界正在探索多種微體積采樣方法，而這將進(jìn)一步大幅度地減少樣本體積。另外，在分析小鼠腦脊液等基質(zhì)的樣本時(shí)，只有2-5ml的體積可用?？紤]到有可能意外損失樣本，故從動(dòng)物獲得的樣本體積應(yīng)足以分析樣本至少兩次。因此，應(yīng)當(dāng)首選能夠使用低樣本體積的分析技術(shù)和平臺(tái)。 2) 定量動(dòng)態(tài)范圍 能夠在寬廣的動(dòng)態(tài)范圍內(nèi)，至少包含3-4個(gè)數(shù)量級(jí)，進(jìn)行定量分析是極其有益的。對(duì)于PK分析，這允許較高的最小稀釋要求（minimum required dilution，MRD），以盡量減少樣本基質(zhì)效應(yīng)，同時(shí)為低劑量給藥的樣本提供所需的定量靈敏度。同樣，對(duì)于PD，它允許在更寬廣的范圍內(nèi)測試平行性（parallelism），從而允許對(duì)含有高濃度生物標(biāo)志物的樣品進(jìn)行大幅度的稀釋。對(duì)于生物標(biāo)志物測量，稀釋還有助于最大限度地減少樣本和基于緩沖液的標(biāo)準(zhǔn)曲線（替代基質(zhì)）之間的基質(zhì)差異，從而更精確地生成定量數(shù)據(jù)。 3) 分析運(yùn)行時(shí)間 分析運(yùn)行時(shí)間是實(shí)施PK/PD樣本分析所需時(shí)間，假定使用之前已為該應(yīng)用開發(fā)分析方法，這也意味著假定試劑已標(biāo)記，緩沖液已制備，并且相關(guān)儀器也已準(zhǔn)備就緒。在non-GLP臨床前生物分析實(shí)驗(yàn)室中，時(shí)間是至關(guān)重要的；在大多數(shù)情況下，最終目標(biāo)是提供可靠，且可以重現(xiàn)的數(shù)據(jù)，同時(shí)保持較短的分析運(yùn)行時(shí)間。這就提高了實(shí)驗(yàn)室的效率，并允許該部門同時(shí)支持多個(gè)項(xiàng)目。分析96樣本微孔板的運(yùn)行時(shí)間可以在1-5小時(shí)的范圍之間，具體取決于采用的分析技術(shù)（對(duì)于某些分析技術(shù)，有額外的隔夜捕獲步驟overnight capture step）。 4) 靈敏度 大多數(shù)傳統(tǒng)的單克隆抗體的PK定量LLOQ在幾個(gè)ng/ml范圍。一些高效力藥物分子（需要低劑量）和低豐度（或下調(diào)了的）的生物標(biāo)志物可能需要更高的靈敏度。應(yīng)當(dāng)依據(jù)個(gè)案的情況為這些應(yīng)用選擇相應(yīng)的分析平臺(tái)。此外，高靈敏度的分析方法是高度依賴所使用的試劑，因此獲得高特異性和高親和力的試劑可以大大提高定量的靈敏度。提升分析靈敏度也同時(shí)降低了對(duì)樣本體積的要求，見1）。 5) 自動(dòng)化 自動(dòng)化平臺(tái)可縮短分析人員操作的時(shí)間，提高生物分析部門的效率。在臨床前藥物開發(fā)的環(huán)境中，分析平臺(tái)的完全自動(dòng)化，在需要開發(fā)分析方法且進(jìn)行常規(guī)樣本分析的情況下是非常有益的。同時(shí)，對(duì)于方法開發(fā)，優(yōu)化和因基質(zhì)或物種變化而進(jìn)行的方法認(rèn)證，需要能夠修改自動(dòng)化平臺(tái)上的檢測方法的靈活性。 除了分析測試自動(dòng)化之外，還可以自動(dòng)化地制備標(biāo)準(zhǔn)品（standards）和質(zhì)量控制樣品（QCs），從而節(jié)省時(shí)間，降低珍貴參照（比）物料（reference material）的使用和成本，并減少手動(dòng)移液產(chǎn)生的誤差。一些分析測試平臺(tái)，如Gyrolab，允許檢測的全自動(dòng)化，而Hamilton和HPD300這樣的平臺(tái)，則可以允許自動(dòng)化移液體，或制備標(biāo)準(zhǔn)品和QCs。超高靈敏度的Simoa™平臺(tái)也支持自動(dòng)化地樣本檢測。3.臨床前LBA免疫測試平臺(tái) 目前，有多種LBA測試平臺(tái)在新藥開發(fā)中得到應(yīng)用。表1列出了若干LBA測試平臺(tái)及其比較。本文將進(jìn)一步介紹其中幾種在生物分析行業(yè)中應(yīng)用比較廣泛的平臺(tái)。由于為臨床前研究開發(fā)分析方法所選擇的LBA平臺(tái)，很可能會(huì)繼續(xù)在臨床研究中繼續(xù)使用，因此，選擇合適的測試平臺(tái)，將會(huì)是影響深遠(yuǎn)的一個(gè)重大決定。表1. 若干LBA測試平臺(tái)相關(guān)特征的比較備注：上表中的方法未全部在文中詳細(xì)介紹。 近年來，一系列immunoassay的新技術(shù)，特別是基于微（磁）珠（beads，magnetic，etc.）的技術(shù)，從測試格式的物理學(xué)/物理化學(xué)層次，待測物的捕獲，檢測信號(hào)的收集/放大，數(shù)據(jù)處理等方面，實(shí)現(xiàn)了顯著改善，并取得了相當(dāng)?shù)纳虡I(yè)性成功，雖然這些新方法在化學(xué)和生物學(xué)層次，仍然是基于抗體-抗原的結(jié)合作用以及基本的夾心式immunoassay。本文選擇若干得到廣泛商業(yè)應(yīng)用的測試平臺(tái)，及其在臨床前生物分析方法開發(fā)的應(yīng)用作初步介紹，希望起到拋磚引玉的目的，引發(fā)更多關(guān)于新的分析測試技術(shù)的開發(fā)和應(yīng)用的相關(guān)討論、交流和研究。ELISA平臺(tái) ELISA是生物制藥行業(yè)內(nèi)外使用最廣泛的配體結(jié)合式（LBA）檢測平臺(tái)。ELISA的測試格式包括直接式、間接式和夾心式；ELISA經(jīng)常用作與開發(fā)中的新分析平臺(tái)進(jìn)行比較的基礎(chǔ)；在96孔板上，通常對(duì)樣本進(jìn)行復(fù)孔（duplicate）測定，手動(dòng)或半自動(dòng)運(yùn)行。通常使用比色法的檢測試劑，但有時(shí)也使用其他檢測試劑，如發(fā)光（luminescence）和熒光（fluorescence）。通常，對(duì)ELISA方法，需要監(jiān)測試劑，如抗體（antibodies）、配體（ligands）、緩沖液（buffers）以及批次的變化。 幾十年來，傳統(tǒng)的ELISA一直是蛋白質(zhì)定量分析最常用的技術(shù)，因此也是最可靠的技術(shù)之一。即使在今天，大多數(shù)生物標(biāo)志物的商業(yè)檢測試劑盒都是基于ELISA的。多數(shù)新分析技術(shù)都與作為金標(biāo)準(zhǔn)的ELISA比較。但是，這種分析技術(shù)也有缺點(diǎn)，例如，測試運(yùn)行時(shí)間約長為 4-5 小時(shí)，樣品體積消耗大（測定體積為100 ml），靈敏度低與LLOQ在大多數(shù)情況下接近低-中ng/ml，以及狹窄定量動(dòng)態(tài)范圍（2-3 數(shù)量級(jí)）。這項(xiàng)技術(shù)對(duì)于某些臨床前生物分析的應(yīng)用仍然很有吸引力，比如血清單克隆抗體的PK。該平臺(tái)還提供了在方法開發(fā)早期階段評(píng)估測試方法不同部分的靈活性。表2列出了不同檢測平臺(tái)的性能，以一個(gè)mAb藥物為例。表2. 與ELISA比色法檢測相比較，一個(gè)mAb在若干檢測平臺(tái)上LBA方法參數(shù)的比較備注：上表中的方法未全部在文中詳細(xì)介紹。電化學(xué)發(fā)光(Electrochemiluminescence，MSD)平臺(tái)MSD平臺(tái)是一種基于微孔板的測試格式，它利用電化學(xué)發(fā)光（ECL）信號(hào)進(jìn)行檢測。在這個(gè)平臺(tái)上，免疫測試格式類似于用于藥物定量和target sample measurements的典型ELISA格式，但預(yù)計(jì)靈敏度會(huì)因使用化學(xué)發(fā)光而增加。MSD平臺(tái)似乎主要在檢測信號(hào)的產(chǎn)生和收集上，相對(duì)于ELISA有顯著改善：MSD采用SULFO-TAG（三聯(lián)吡啶釕）是一種發(fā)光底物，其分子量約為1000Da（大約是HRP的1/40），因此空間位阻小，易于標(biāo)記抗體，且不易妨礙其與待測物或其它抗體的結(jié)合。SULFO-TAG在陽極表面失去電子，發(fā)生氧化，在三丙胺陽離子自由基的催化及三角形脈沖電壓激發(fā)下，可產(chǎn)生高效、穩(wěn)定、連續(xù)的電化學(xué)發(fā)光信號(hào)，使得檢測信號(hào)增強(qiáng)并穩(wěn)定（見圖1）。圖1. MSD的電化學(xué)發(fā)光產(chǎn)生的檢測信號(hào) MSD的電化學(xué)發(fā)光技術(shù)在生物分析行業(yè)廣受歡迎。它保持了ELISA格式的優(yōu)點(diǎn)，如方法開發(fā)的靈活性，另外在其它領(lǐng)域也非常出色，如較小的樣品體積要求（測定體積為25–30 ml），更高的靈敏度（低-中pg/ml）和寬泛的動(dòng)態(tài)范圍（4-5個(gè)數(shù)量級(jí)）。當(dāng)以均相的測試格式運(yùn)行時(shí)，此平臺(tái)可能受到鉤效應(yīng)（hook effect）的影響。鉤效應(yīng)起源于不合適的抗體-抗原濃度比例，但是可以減輕甚至消除的。此外，試劑和微孔板容易有批次間的變化，因此，強(qiáng)烈建議在批次之間進(jìn)行交叉比較。 MSD微孔板的孔底為石墨底，捕獲抗體包被載量可提升10-50倍，檢測范圍比ELISA擴(kuò)展了10-100倍，定量動(dòng)態(tài)范圍高達(dá)5-6個(gè)數(shù)量級(jí)，靈敏度可提升10-1000倍（fg/ml-pg/ml級(jí)別）。根據(jù)對(duì)血清免疫學(xué)中的“帶現(xiàn)象”的理解，可推測：包被抗體載量可以根據(jù)檢測靈敏度的需要進(jìn)行調(diào)整，以避免鉤效應(yīng)（hook effect）。分析運(yùn)行時(shí)間接近約3-4小時(shí)，但考慮到該平臺(tái)提供的其它優(yōu)勢，測試時(shí)間可被視為一個(gè)合理的折中。該平臺(tái)允許同時(shí)運(yùn)行多個(gè)96孔板，因此在分析數(shù)百個(gè)樣品時(shí)，測試一個(gè)或多個(gè)96孔板也只需要基本相同的時(shí)間，這一點(diǎn)可能非常有利。此平臺(tái)不是自動(dòng)化的，因?yàn)樗枰治鋈藛T參與每個(gè)步驟。此外，該平臺(tái)還提供與實(shí)驗(yàn)室信息管理系統(tǒng)（LIMS）的集成和US FDA 21 CFR part 11的合規(guī)性，允許分析方法結(jié)果容易地轉(zhuǎn)移到GLP的環(huán)境中。Gyrolab平臺(tái) Gyrolab是一個(gè)非96微孔板的免疫測試平臺(tái)，具有液體處理功能（liquid handling capability），使用小體積的樣本和試劑在光盤（CD）上實(shí)施免疫測定。該測試格式使用biotinylated捕獲試劑和標(biāo)記有fluorophore的檢測試劑，在納升體積的使用親和力微珠填料的捕獲柱（nanoliter volume affinity capture column）上進(jìn)行測試。利用CD的微觀結(jié)構(gòu)確定樣品和試劑的體積，并通過旋轉(zhuǎn)CD將樣本加到捕獲柱上。在每個(gè)CD上，有96（在1000nlCD上）-112（在20或200nl CD上）個(gè)微觀結(jié)構(gòu)，可產(chǎn)生96-112個(gè)數(shù)據(jù)點(diǎn)（1小時(shí)/CD運(yùn)行時(shí)間）。在Gyrolab工作站上，樣品處理完全自動(dòng)化，液體處理臂將樣品和試劑從微孔板轉(zhuǎn)移到CD，并通過激光/檢測器測定每個(gè)捕獲柱的熒光信號(hào)?；A(chǔ)的Gyrolab xPlore™ 允許無人值守地一次分析1張CD，而Gyrolab xPand™允許分析多達(dá)5張CD（即480-560個(gè)數(shù)據(jù)點(diǎn)）。在大多數(shù)情況下，動(dòng)態(tài)范圍為3-4個(gè)數(shù)量級(jí)。該平臺(tái)的靈敏度可與MSD的ECL平臺(tái)（低-中pg/ml）相媲美。 Gyrolab是一個(gè)自動(dòng)化的微流體系統(tǒng)（microfluidic system），且其離心操作能夠高效地處理微量體積，因此大多數(shù)重復(fù)(duplicate）分析只需要小于5ml的樣本體積，就可以從同一微孔板重新分析未使用的樣品。該平臺(tái)使用包被了捕獲抗體的微珠來捕獲待測物，與下面討論的Luminex和Simoa平臺(tái)在捕獲待測物的原理上，即在更大的固相表面積上有更多的捕獲抗體（與ELISA相比），似乎有異曲同工之妙，總體效果是提升了捕獲待測物的效率，提升了靈敏度。Gyrolab的一個(gè)出色特點(diǎn)是，可以選擇不同的CD來調(diào)整定量的動(dòng)態(tài)范圍，以滿足對(duì)低或高濃度樣本的分析。該分析技術(shù)平臺(tái)對(duì)于大分子的常規(guī)臨床前PK/PD分析無疑是非常有效的。此平臺(tái)在縮短檢測時(shí)間方面非常有效，無需人工移液和參與分析的每一步驟。這使得該平臺(tái)對(duì)開發(fā)方法和分析樣本都極具吸引力。此外，該平臺(tái)還提供實(shí)驗(yàn)室信息管理系統(tǒng)集成和FDA 21 CFR part 11合規(guī)性，能夠?qū)⒎治龇椒ㄝp松地轉(zhuǎn)移到GLP環(huán)境中去。 Gyros的一個(gè)可能缺點(diǎn)是，如果以基于微孔板格式開發(fā)了分析方法檢測，則相同的試劑在轉(zhuǎn)移到Gyros時(shí)可能會(huì)性能欠佳，并且可能需要顯著地優(yōu)化才能獲得最佳性能。這是因?yàn)镚yros的孵育時(shí)間極短，需要高結(jié)合效率的捕獲試劑，而基于微孔板的檢測則不需要這種試劑，因?yàn)檩^長的孵育時(shí)間抵消了該需求。因此，如果使用Gyros，則需要在同一平臺(tái)對(duì)試劑進(jìn)行篩選，然后測試其分析性能，并開發(fā)完整的分析方法。BIAcore平臺(tái) 基于BIAcore平臺(tái)的藥物分析，依賴于待測物與固定在傳感器芯片（sensor chip surface）表面的待測物特異的試劑的相互作用。BIAcore實(shí)時(shí)監(jiān)測該結(jié)合相互作用，并讀出以相對(duì)響應(yīng)單元（relative response units，RU）為單位的響應(yīng)，該響應(yīng)與Surface Plasmon Resonance（SPR）角度的變化相關(guān)，并且由傳感器芯片表面的液體薄膜的折射率變化所決定。折射率的變化與芯片表面結(jié)合的質(zhì)量成正比。這種實(shí)時(shí)的無標(biāo)記技術(shù)與典型的免疫測定法有很大的不同，免疫測定法需要多個(gè)孵育和洗滌步驟，以及用于信號(hào)讀出的標(biāo)記檢測抗體（labeled detection antibody）。對(duì)于臨床前藥物分析，可以將抗藥物特異性抗體固定在芯片表面實(shí)施通用化檢測，當(dāng)樣本流經(jīng)分析隔室（cell）時(shí)，該抗體將結(jié)合樣本中所含有的mAb藥物。其它方式，如在芯片上固定待測物，也可用于特定的定量分析。對(duì)于此平臺(tái)，在驗(yàn)證期間必須經(jīng)過10個(gè)周期的殘留（carry-over）測試，并且還應(yīng)確定最大信號(hào)值（相對(duì)于背景值）的信號(hào)噪聲比（signal-to-noise ratio），以評(píng)估樣本分析期間的方法運(yùn)行性能。此外，還必須評(píng)估在執(zhí)行大批量樣本分析的較長時(shí)期內(nèi)的芯片穩(wěn)定性（分析方法是特定于所使用的芯片類型）。由于該平臺(tái)通常運(yùn)行一夜或更長時(shí)間，故樣本和試劑的穩(wěn)定性必須比典型的免疫測試方法具有更長的短期穩(wěn)定性（超過24小時(shí)），而且在Biacore T200上，樣本的總通量（overall sample throughput）較低。此外，單個(gè)分析運(yùn)行需要包含校準(zhǔn)曲線后和運(yùn)行序列中間隔的QC樣本。通常，這對(duì)應(yīng)于一個(gè)微孔板的校準(zhǔn)品（calibration standards，Cs）和樣本。 可以對(duì)BIAcore實(shí)施IQ/OQ/PQ驗(yàn)證，以滿足符合21 CFR Part 11的要求。使BIAcore儀器達(dá)到GLP合規(guī)的狀態(tài)不是一個(gè)簡單的過程，需要投入大量時(shí)間來處理數(shù)據(jù)傳輸（data transfer）和合適的校準(zhǔn)（隨時(shí)間推移的）等問題。 該測試平臺(tái)更多地用于LBA關(guān)鍵試劑的篩選和表征。LBA關(guān)鍵試劑一般定義為：對(duì)待測物（analyte）特異性的LBA分析試劑，如抗體、多肽、蛋白質(zhì)、耦合物（標(biāo)記），作為試劑的藥物和ADA試劑（陽性和陰性對(duì)照品）。多通道（multiplexing）分析技術(shù) Multiplexing測試方法可以節(jié)省時(shí)間和寶貴的樣品。但是，存在一個(gè)局限：即它們經(jīng)過嚴(yán)格優(yōu)化，只能在指定范圍和基質(zhì)中使用。不同的待測物對(duì)不同的基質(zhì)和稀釋的反應(yīng)不同，因此，對(duì)于某個(gè)待測物，優(yōu)化參數(shù)的偏差可能需要重新優(yōu)化整個(gè)multiplexing檢測方法。在臨床前生物分析中，需要探索了解多種藥物、多個(gè)藥物變異體、多種藥物的組合和多種生物標(biāo)志物。因此，檢測的靈活性是非常關(guān)鍵的，對(duì)此multiplexing可能幫助意義不是很大。 在樣本體積十分有限的特殊情況下，可以探索multiplexing。允許自主開發(fā)multiplexing方法的平臺(tái)包括：Luminex的xMAP技術(shù)，使用獨(dú)特的dyed beads，并取決于所使用的儀器（MAGPIX、LUMINEX 200或FLEXMAP 3D），可以分析50-500待測物；Quanterix SR-X，使用6個(gè)獨(dú)特的磁珠，可以multiplexing多達(dá)6個(gè)待測物；Quanterix SP-X可以multiplexing到10個(gè)待測物，使用其基于平面陣列的空間分離的化學(xué)發(fā)光成像技術(shù)。其中，MSD允許從黃金標(biāo)準(zhǔn)的singleplex平臺(tái)直接轉(zhuǎn)換到U-PLEX平臺(tái)進(jìn)行檢測；Quanterix的SR-X和SP-X平臺(tái)在multiplexing時(shí)能夠提供超高靈敏度。Luminex平臺(tái) 常用的Luminex®100/200™系統(tǒng)是基于流式細(xì)胞學(xué)（flow cytometry）原理的靈活程度很高的分析儀。該系統(tǒng)使用很小的樣本體積，在單個(gè)微孔板的孔/井中multiplex（同時(shí)測定）多達(dá)100個(gè)待測物。該平臺(tái)可以操作許多檢測格式，包括核酸測試方法（nucleic acid assays）、受體-配體測試方法（receptor-ligand assays）、免疫測試方法（immunoassays）和酶測試方法（enzymatic assays），并提供快速且經(jīng)濟(jì)高效的生物測試結(jié)果。 該系統(tǒng)是xMAP® 3個(gè)核心檢測技術(shù)的組合。第1個(gè)是xMAP微球，這是一個(gè)熒光染色，微米大小的聚苯乙烯微球系列，既作為標(biāo)識(shí)符，又充當(dāng)建立測試方法的固體表面。第2個(gè)是基于流式細(xì)胞學(xué)的儀器（flow cytometry-based instrument），Luminex 100/200分析儀集成了關(guān)鍵的xMAP檢測組件，如激光、光學(xué)器件、流體技術(shù)和高速數(shù)字信號(hào)處理器。第3個(gè)組件是xPONENT®軟件，它專門設(shè)計(jì)為基于方案（protocol-based）的數(shù)據(jù)采集方式，具有強(qiáng)大的數(shù)據(jù)回歸分析的能力。 Luminex利用特定染料的珠子（beads），該珠子包被有特定的抗待測物抗體。添加待測物孵育后，再添加熒光標(biāo)記的抗體，以檢測和定量待測物。此項(xiàng)技術(shù)使用供應(yīng)商預(yù)先生產(chǎn)的試劑盒，主要用于PD檢測，即生物標(biāo)志物的定量分析，并且采用多通路檢測（multiplexing）的方式。商業(yè)化的試劑盒數(shù)量巨大，據(jù)稱達(dá)1,300余種。一個(gè)樣本可以用于測定多個(gè)待測物，據(jù)稱最多可達(dá)500個(gè)，并且可以對(duì)每種待測物設(shè)置接受標(biāo)準(zhǔn)。不足之處是：不同待測物珠子（analyte beads）有交互干擾（cross-talk）的傾向，而且測試方法對(duì)光敏感，因此必須采取特殊的預(yù)防措施。超高靈敏的定量分析技術(shù) 對(duì)于某些藥物和樣本基質(zhì)，可能需要具有fg/ml-低pg/ml的超高靈敏度的定量分析方法。相關(guān)狀況包括定量低豐度的生物標(biāo)志物，對(duì)強(qiáng)效藥物分子的PK分析和定量極易受到基質(zhì)效應(yīng)影響的待測物，顯然，大幅度稀釋樣本會(huì)提升對(duì)測定平臺(tái)靈敏度和定量動(dòng)態(tài)范圍的要求。 目前，允許自主開發(fā)方法的超高靈敏度的定量分析平臺(tái)包括來自Quanterix，基于Simoa™的數(shù)字化ELISA，來自Singulex的使用單分子計(jì)數(shù)（single molecule counting）的Erenna™，以及來自Chimera Biotec GmbH的基于免疫PCR（immuno-PCR）的Imperacer。 之前已經(jīng)發(fā)表的文章詳細(xì)評(píng)估了這3種超高靈敏度的分析技術(shù)，以及其它不太流行的分析技術(shù)。這3種技術(shù)都是需要供應(yīng)商提供檢測方法的分析儀器，但都允許用戶自主開發(fā)檢測方法。當(dāng)擁有實(shí)時(shí)定量PCR（qPCR）儀器（thermal cycler fitted with a fluorimeter）時(shí)，還可以獨(dú)立于供應(yīng)商提供的試劑或儀器開發(fā)Immuno-PCR方法。在使用這些技術(shù)時(shí)，需要特別注意一些非常規(guī)情況，包括Simoa™ 的磁珠偶合，DNA與檢測試劑的偶合，以及無污染地操作immuno-PCR?；趩畏肿雨嚵校⊿imoa™）的數(shù)字化ELISA 來自Quanterix公司的Simoa™數(shù)字化ELISA是一個(gè)很有前途的平臺(tái)，它可以使蛋白質(zhì)定量達(dá)到fg/ml。該技術(shù)采用基于微觀順磁珠（microscopic paramagnetic bead）的免疫測試方法，并結(jié)合獨(dú)特的信號(hào)檢測和數(shù)據(jù)采集系統(tǒng)。數(shù)字化ELISA分2個(gè)階段實(shí)施。在捕獲抗原的第1階段，涂有捕獲試劑的微觀磁珠與樣品混合，然后加入生物素標(biāo)記的檢測抗體（biotinlabeled detection antibody）和鏈球菌素-β-半乳糖酶（streptavidin–b-galactosidase）。然后，這些珠子被加載到光盤上，光盤上裝有一系列體積為飛升（femtoliter）大小的微井陣列。每個(gè)微井的直徑為4.5mm，能夠容納直徑為2.7mm的珠子數(shù)目只能為1或者為0。被硅膠墊片密封的微井含有熒光底物，其用于信號(hào)生成和放大（圖2）。Simoa™ 技術(shù)在定量分析的第二階段采用了獨(dú)特的信號(hào)檢測系統(tǒng)。微井（50飛升）中濃度相對(duì)較高的發(fā)出熒光的產(chǎn)物（陽性事件）和白光散射（white light scattering）測定的總珠子負(fù)載可以由標(biāo)準(zhǔn)的CCD攝像機(jī)輕松地檢測到和記錄。通過改進(jìn)幾個(gè)檢測步驟，Simoa™ 實(shí)現(xiàn)了超高靈敏度。圖2. 在飛升體積（femtoliter）的井陣列中裝載，密封和成像單個(gè)順磁珠 因?yàn)樵?00mL的反應(yīng)體積中有約200,000個(gè)磁珠，而每個(gè)磁珠捕獲約80,000個(gè)抗體分子，抗體-待測蛋白的比值和平衡允許高效地在給定的示例中，>70%捕獲待測物。由于溶液中有這么多的磁珠，而且可以在溶液中運(yùn)動(dòng)，所以捕獲效率進(jìn)一步提高，因?yàn)槊總€(gè)目標(biāo)蛋白在不到1分鐘時(shí)間內(nèi)就會(huì)遇到磁珠。這與傳統(tǒng)的LBA方法中，固定在一個(gè)表面的捕獲抗體與待測物的緩慢結(jié)合完全相反。另外，優(yōu)化了的biotin-labeled detection antibody與streptavidin–b-galactosidase之間的比值，可減少檢測背景并最大化特定信號(hào)的采集。與Simoa™檢測系統(tǒng)相結(jié)合，相關(guān)熒光信號(hào)可以通過熒光底物（fluorogenic substrate）的酶消化（enzymatic digestion），而進(jìn)一步放大。 Simoa™ 檢測系統(tǒng)能夠檢測到單個(gè)結(jié)合事件（a single binding event），該事件可以在低濃度下以數(shù)字方式獲得（靈敏度增高，數(shù)字化ELISA），或在高濃度模式下以模擬的方式獲得（擴(kuò)展了的定量動(dòng)態(tài)范圍）。熒光用于檢測酶活性，并能夠測定每個(gè)磁珠上酶的平均值。與下面描述的Erenna®平臺(tái)一樣，結(jié)合數(shù)字式和模擬式的讀數(shù)功能，可以實(shí)現(xiàn)非常寬廣的定量動(dòng)態(tài)范圍。由于最終信號(hào)采集是在平面陣列上完成標(biāo)準(zhǔn)成像，因此與使用 Erenna®等流體系統(tǒng)的數(shù)值讀出相比，數(shù)據(jù)采集更快。 盡管Erenna® 和Simoa™ 平臺(tái)具有數(shù)字讀出和寬廣的定量動(dòng)態(tài)范圍等共同點(diǎn)，但Simoa™ 平臺(tái)是一個(gè)完全自動(dòng)化的系統(tǒng)，該儀器可以實(shí)施樣品稀釋（高達(dá)1:10稀釋），混合，洗滌，孵化和數(shù)據(jù)采集步驟。Simoa™ 能夠同時(shí)測定多達(dá)10種不同的待測物（multiplexing）。這是通過對(duì)單個(gè)捕獲抗體使用不同的dye linkers來實(shí)現(xiàn)的。之后，對(duì)陣列進(jìn)行多個(gè)波長的熒光成像，以識(shí)別擁有不同dye linkers的亞組，并確定是否存在enzyme reporter標(biāo)記。與Singulex和Quanterix一樣，有許多試劑盒可供選擇。也可以“定制”開發(fā)，或“自主開發(fā)”分析方法。 憑借較高的靈敏度、multiplexing和自動(dòng)化功能，該平臺(tái)看起來非常理想。Simoa™平臺(tái)與LIMS系統(tǒng)兼容，其軟件滿足監(jiān)管級(jí)別的生物分析據(jù)FDA 21 CFR part 11的合規(guī)性要求。筆者認(rèn)為該平臺(tái)因其超高靈敏度（可以使用微量樣本體積）和自動(dòng)化操作，在相當(dāng)?shù)某潭壬峡梢蕴娲鶪yrolab平臺(tái)，用于臨床前PK樣本分析。Singulex Erenna®平臺(tái) Erenna®免疫測試系統(tǒng)利用兩步的過程實(shí)現(xiàn)超高靈敏度定量分析（ultrasensitive assays）。最初，使用biotinylated capture試劑和熒光標(biāo)記檢測試劑，在96孔板中實(shí)施基于珠子（beads）的夾心式測試格式。從珠子上洗脫的被捕獲待測物被轉(zhuǎn)移到一個(gè)384孔的讀取板（reading plate），然后將該讀取板放置到檢測儀器上。然后樣本一個(gè)接一個(gè)地通過毛細(xì)管進(jìn)入flow cell，并在其中實(shí)施激光誘導(dǎo)的單分子檢測分析。該平臺(tái)的優(yōu)勢是寬廣的定量動(dòng)態(tài)范圍，其通過獨(dú)特的軟件曲線擬合算法實(shí)現(xiàn)。該算法利用了多次讀數(shù)，提升了靈敏度。 與其它測試平臺(tái)相比，檢測時(shí)間較長，但一些線下的自動(dòng)化設(shè)備可用于洗滌和轉(zhuǎn)移步驟。該平臺(tái)通常用于PD檢測，但也可用于PK定量分析。對(duì)供應(yīng)商生產(chǎn)和供應(yīng)的試劑盒，其穩(wěn)定性必須由最終用戶評(píng)估，因?yàn)樵噭┑姆€(wěn)定性通常是未知的。此外，可以購買通用試劑，以開發(fā)內(nèi)部的檢測試劑，而且，基于微孔板的格式也能兼容使用96或384孔板的平臺(tái)。供應(yīng)商建議對(duì)校準(zhǔn)品（Cs）進(jìn)行3次復(fù)測（triplicate），以便在低濃度下進(jìn)行精確分析。可以通過IQ/OQ程序，與內(nèi)部PQ相結(jié)合，驗(yàn)證Erenna®平臺(tái)。如果將Erenna®與LIMS結(jié)合，以實(shí)施監(jiān)管級(jí)生物分析，則一個(gè)選擇是使用讀出的三個(gè)信號(hào)之一進(jìn)行濃度分析。但是，動(dòng)態(tài)范圍和靈敏度可能會(huì)受到影響，具體取決于選擇哪個(gè)讀出的信號(hào)。Immuno-PCR (Polymerase Chain Reaction) Immuno-PCR（Chimera）是一種擴(kuò)增免疫測試技術(shù)（signal amplification immunoassay）。它涉及DNA標(biāo)記的檢測抗體的擴(kuò)增，從而提高靈敏度。與ELISA中使用的抗體-酶偶合物（antibody–enzyme conjugates）不同，IPCR中的關(guān)鍵試劑是抗體-DNA偶合物（antibody–DNA conjugates），其中一個(gè)DNA標(biāo)記（marker）與檢測抗體相偶合。然后，將DNA polymerase加入到反應(yīng)主混合物之中，就可以放大檢測信號(hào)，并通過定量PCR（qPCR）而定量測定DNA-marker的濃度，從而定量分析analyte–antibody immunocomplex。因此，該技術(shù)主要改進(jìn)了檢測信號(hào)的放大方法。但是，如果檢測抗體與血清或血漿中的成分發(fā)生交叉反應(yīng)，該平臺(tái)可能容易受到強(qiáng)大基質(zhì)效應(yīng)的影響。因此，在方法驗(yàn)證期間必須評(píng)估信噪比，并用于確定樣本分析期間方法的性能。 該平臺(tái)的優(yōu)點(diǎn)包括寬廣的定量動(dòng)態(tài)范圍和提升了的靈敏度，這對(duì)PD分析是很有益的。與 Erenna®平臺(tái)一樣，檢測試劑高度依賴于供應(yīng)商，對(duì)于大批量樣本分析來說，成本可能很高。如同MSD、Erenna®和其它基于珠子的平臺(tái)一樣，應(yīng)特別注意標(biāo)記試劑和微孔板批次的變化。由于該平臺(tái)依賴于PCR技術(shù)，因此在處理樣本、試劑和移液器槍頭時(shí)必須小心謹(jǐn)慎，以避免污染。此外，數(shù)據(jù)分析可能也會(huì)較為麻煩（cumbersome）。7. 特別聲明 本文如有疏漏和誤讀相關(guān)指南和數(shù)據(jù)的地方，請(qǐng)讀者評(píng)論和指正。所有引用的原始信息和資料均來自已經(jīng)發(fā)表學(xué)術(shù)期刊, 官方網(wǎng)絡(luò)報(bào)道等公開渠道, 不涉及任何保密信息。 參考文獻(xiàn)的選擇考慮到多樣化但也不可能完備。歡迎讀者提供有價(jià)值的文獻(xiàn)及其評(píng)估。參 考 文 獻(xiàn) 1. Eangoor, P. (2020). "A guided approach to preclinical bioanalysis of proteins using immunoassays for pharmacokinetic and pharmacodynamic assessments." Bioanalysis 12(16): 1105-1110.2. Fischer SK, et al. Emerging technologies to increase ligand binding assay sensitivity. AAPS J. 17(1), 93–101 (2015).3. Dudal S, et al. Assay formats: recommendation for best practices and harmonization from the Global Bioanalysis Consortium Harmonization Team. AAPS J. 16, 194–205 (2014).4. Patel SR, et al. Microsampling for quantitative bioanalysis, an industry update: output from an AAPS/EBF survey. Bioanalysis 11(7), 619–628 (2019).5. Roman J, et al. Application of miniaturized immunoassays to discovery pharmacokinetic bioanalysis. J. Pharmacol. Toxicol. Methods 63(3), 227–235 (2011).6. Leary BA, et al. Bioanalytical platform comparison using a generic human IgG PK assay format. J. Immunol. Methods 397(1–2), 28–36 (2013).7. Duo J, et al. Surface plasmon resonance as a tool for ligand-binding assay reagent characterization in bioanalysis of biotherapeutics. Bioanalysis 10(8), 559–576 (2018).8. Spengler M, et al. Highly sensitive ligand-binding assays in pre-clinical and clinical applications: immuno-PCR and other emerging techniques. Analyst 140(18), 6175–6194 (2015).9. Lind K, Kubista M. Development and evaluation of three real-time immuno-PCR assemblages for quantification of PSA. J. Immunol. Methods 304(1–2), 107–116 (2005).10. Attallah C, et al. Design and validation of an immuno-PCR assay for IFN-α2b quantification in human plasma. Bioanalysis 11(23), 2175–2188 (2019).11. Woodbury N, et al. Application of multiplexed pharmacokinetic immunoassay to quantify in vivo drug forms and coadministered biologics. Bioanalysis 11(24), 2251–2268 (2019).12. Stevenson LF, Purushothama S. Parallelism: considerations for the development, validation and implementation of PK and biomarker ligand-binding assays. Bioanalysis 6(2), 185–198 (2014).13. Lee JW, et al. Fit-for-purpose method development and validation for successful biomarker measurement. Pharm. Res. 23(2), 312–328 (2006).14. Stevenson L, et al. Large molecule specific assay operation: recommendation for best practices and harmonization from the Global Bioanalysis Consortium Harmonization Team. AAPS J. 16(1), 83–88 (2014).15. Desilva B, et al. Recommendations for the bioanalytical method validation of ligand-binding assays to support pharmacokinetic assessments of macromolecules. Pharm. Res. 20(11), 1885–1900 (2003).16. Lee JW, et al. Bioanalytical approaches to quantify ‘total’ and ‘free’ therapeutic antibodies and their targets: technical challenges and PK/PD applications over the course of drug development. AAPS J. 13(1), 99–110 (2011).17. Pearson JT, Rock DA. Bioanalytical approaches to assess the proteolytic stability of therapeutic fusion proteins. Bioanalysis 7(23), 3035–3051 (2015).18. Vasicek LA, et al. Direct quantitation of therapeutic antibodies for pharmacokinetic studies using immuno-purification and intact mass analysis. Bioanalysis 11(3), 203–213 (2019).關(guān)于博濟(jì)醫(yī)藥 臨床研究服務(wù)：博濟(jì)醫(yī)藥擁有一支規(guī)模龐大、專業(yè)成熟的臨床研究隊(duì)伍，可提供包括醫(yī)學(xué)、項(xiàng)目管理、監(jiān)查、稽查、數(shù)據(jù)管理和統(tǒng)計(jì)分析、生物樣本檢測在內(nèi)的臨床試驗(yàn)全流程解決方案。截至2020年，博濟(jì)醫(yī)藥服務(wù)的客戶超1000家，完成800多項(xiàng)臨床試驗(yàn)項(xiàng)目，助力客戶獲得新藥證書60多項(xiàng)、生產(chǎn)批件超過80項(xiàng)。擁有豐富的臨床試驗(yàn)服務(wù)經(jīng)驗(yàn)，服務(wù)項(xiàng)目涵蓋臨床研究各個(gè)領(lǐng)域，在腫瘤、肝病、消化等創(chuàng)新藥領(lǐng)域擁有獨(dú)特的臨床服務(wù)體系。博濟(jì)醫(yī)藥在全國設(shè)有40多個(gè)臨床監(jiān)查網(wǎng)點(diǎn)，與全國近600個(gè)臨床試驗(yàn)機(jī)構(gòu)展開合作，并運(yùn)用ORACLE OC/RDC及CTMS系統(tǒng)，控制臨床數(shù)據(jù)采集的及時(shí)性、管理臨床試驗(yàn)過程的規(guī)范性。

今天（7月28日）是第十一個(gè)“世界肝炎日”。國家衛(wèi)生健康委疾控局確定今年的宣傳主題是“積極預(yù)防，主動(dòng)檢測，規(guī)范治療，全面遏制肝炎危害”，旨在號(hào)召公眾積極主動(dòng)接種肝炎疫苗，主動(dòng)進(jìn)行體檢了解肝臟健康狀況，慢性病毒性肝炎患者接受規(guī)范的抗病毒治療，全面遏制病毒性肝炎對(duì)人類健康的威脅。 作為國內(nèi)知名的CRO企業(yè)，博濟(jì)醫(yī)藥秉承“博采眾方，廣濟(jì)天下”的企業(yè)發(fā)展理念，始終將以造福人類健康為己任，而肝病領(lǐng)域正是博濟(jì)醫(yī)藥CRO服務(wù)的特色優(yōu)勢所在。目前，博濟(jì)醫(yī)藥正在全力推動(dòng)多款肝病創(chuàng)新藥臨床及臨床前研究工作，力圖通過自身努力早日令肝病患者擺脫病魔，恢復(fù)健康。 目前，由西安新通藥物研究有限公司研制開發(fā)、由博濟(jì)醫(yī)藥提供全程CRO服務(wù)的化藥1.1類新藥甲磺酸帕拉德福韋片（下稱PDV）Ⅲ期臨床研究正在順利進(jìn)行中。 該項(xiàng)目于2020年7月召開全國研究者會(huì)，近70個(gè)中心參與，共計(jì)篩選1170例，于2021年7月28日已達(dá)到方案設(shè)定入組目標(biāo)，共計(jì)入組907例。 博濟(jì)醫(yī)藥相關(guān)負(fù)責(zé)人表示，這項(xiàng)大規(guī)模的臨床試驗(yàn)，參與中心眾多，惠及近千個(gè)乙肝患者。項(xiàng)目入組期間，國內(nèi)疫情雖時(shí)有反復(fù)，但在項(xiàng)目總PI?？∑娼淌诘膸ьI(lǐng)下，各研究中心、申辦方、博濟(jì)醫(yī)藥（CRO）緊密協(xié)作、克服困難，確保了研究按計(jì)劃完成入組工作。 PDV項(xiàng)目是國家“十二五、十三五”重大新藥創(chuàng)制項(xiàng)目，Ⅲ期入組工作的順利完成，標(biāo)志著全球首個(gè)乙肝靶向新藥進(jìn)入最后沖刺階段，讓我們共同期待PDV項(xiàng)目的成功。 此外，由豐誠集團(tuán)旗下廣東集寶醫(yī)藥技術(shù)有限公司與美國Nucorion公司合作開發(fā)，博濟(jì)醫(yī)藥為其臨床研究提供全程CRO服務(wù)的1.1類乙肝新藥NCO-48F膠囊項(xiàng)目I期臨床試驗(yàn)也于今年4月在南方醫(yī)科大學(xué)南方醫(yī)院正式啟動(dòng)。該項(xiàng)目由南方醫(yī)科大學(xué)南方醫(yī)院侯金林教授和許重遠(yuǎn)教授為主要研究者（PI），目前I期臨床試驗(yàn)已到尾聲，已有52例完成入組。 此外，博濟(jì)醫(yī)藥還以抗感染類藥物臨床研究為特色，承擔(dān)了適應(yīng)癥包括慢乙肝抗病毒、慢乙肝治愈、肝癌、非酒精性脂肪肝等10余項(xiàng)大型臨床試驗(yàn)。通過臨床試驗(yàn)服務(wù)協(xié)助福建廣生堂阿德福韋酯膠囊、替諾福韋膠囊、恩替卡韋膠囊等藥物的成功獲批上市。 在臨床前階段，博濟(jì)醫(yī)藥在肝病領(lǐng)域的研究亦是矢志不渝。 子公司深圳博瑞在輝瑞制藥PF-06835919（已進(jìn)入Ⅱ期臨床）的基礎(chǔ)上，經(jīng)過結(jié)構(gòu)改造及成藥性優(yōu)化，開發(fā)了己酮糖激酶抑制劑項(xiàng)目（KHKI）。KHKI項(xiàng)目致力于開發(fā)一款治療非酒精性脂肪肝的一類新藥，當(dāng)前已完成自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)化合物設(shè)計(jì)與合成、化合物體外活性篩選及體內(nèi)藥代評(píng)估、初步安全性評(píng)價(jià)、合成工藝研究、PCT專利申報(bào)（化合物專利申請(qǐng)?zhí)枺篜CT/CN2020/090463）等前期研究工作，項(xiàng)目已進(jìn)入CMC藥學(xué)研究階段（口服固體制劑），目前正面向全球?qū)で驥HKI項(xiàng)目的合作開發(fā)或權(quán)益轉(zhuǎn)讓。 博濟(jì)醫(yī)藥相關(guān)負(fù)責(zé)人表示，我國是世界肝病大國，在中國數(shù)以萬計(jì)的肝病患者正在與病魔進(jìn)行著艱苦斗爭，作為服務(wù)于創(chuàng)新藥研發(fā)的企業(yè)，博濟(jì)醫(yī)藥愿與醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)同道一起，共同致力于肝病創(chuàng)新藥的研發(fā)，筑起防治肝病的堅(jiān)實(shí)堡壘，守護(hù)國人健康。 關(guān)于博濟(jì)臨床醫(yī)藥服務(wù)：博濟(jì)醫(yī)藥擁有一支規(guī)模龐大、專業(yè)成熟的臨床研究隊(duì)伍，可提供包括醫(yī)學(xué)、項(xiàng)目管理、監(jiān)查、稽查、數(shù)據(jù)管理和統(tǒng)計(jì)分析、生物樣本檢測在內(nèi)的臨床試驗(yàn)全流程解決方案。截至2020年，博濟(jì)醫(yī)藥服務(wù)的客戶超1000家，完成800多項(xiàng)臨床試驗(yàn)項(xiàng)目，助力客戶獲得新藥證書60多項(xiàng)、生產(chǎn)批件超過80項(xiàng)。擁有豐富的臨床試驗(yàn)服務(wù)經(jīng)驗(yàn)，服務(wù)項(xiàng)目涵蓋臨床研究各個(gè)領(lǐng)域，在腫瘤、肝病、消化等創(chuàng)新藥領(lǐng)域擁有獨(dú)特的臨床服務(wù)體系。博濟(jì)醫(yī)藥在全國設(shè)有40多個(gè)臨床監(jiān)查網(wǎng)點(diǎn)，與全國近600個(gè)臨床試驗(yàn)機(jī)構(gòu)展開合作，并運(yùn)用ORACLE OC/RDC及CTMS系統(tǒng)，控制臨床數(shù)據(jù)采集的及時(shí)性、管理臨床試驗(yàn)過程的規(guī)范性。

吃飯時(shí)來點(diǎn)兒酒，似乎是很多人聚餐的標(biāo)配。大多數(shù)人對(duì)喝酒的認(rèn)識(shí)，就像飯后來一杯酸奶那么平常。近日，《柳葉刀·腫瘤學(xué)》上一項(xiàng)最新研究發(fā)現(xiàn)，2020年全球大約有74萬例的新發(fā)癌癥因飲酒所致。 一石激起千層浪，關(guān)于飲酒致癌的話題再次印發(fā)了業(yè)界關(guān)注，同時(shí)恰逢世界肝炎日臨近（7月28日），飲酒傷身更具現(xiàn)實(shí)意義。2020年 全球喝酒喝出74萬例癌癥 《柳葉刀·腫瘤學(xué)》最新發(fā)表一項(xiàng)來自國際癌癥研究機(jī)構(gòu)（IARC）領(lǐng)銜的全球大型研究，對(duì)飲酒導(dǎo)致全球癌癥負(fù)擔(dān)的最新評(píng)估表明，2020年，全球大約有74萬例新發(fā)癌癥因飲酒所致，中國約有28萬例。 之前已有大量研究顯示，飲酒可能通過多種機(jī)制增加癌癥風(fēng)險(xiǎn)。具體來看，飲酒與某些類型癌癥有著更強(qiáng)關(guān)聯(lián)。 口腔癌和咽癌：大約50%的新發(fā)病例與飲酒有關(guān)。2013-2016年，飲酒共導(dǎo)致了約9.1萬新發(fā)病例。 喉癌：約30%的新發(fā)喉癌與飲酒有關(guān)。2013-2016年，飲酒共導(dǎo)致約1.5萬人患喉癌；而男性喉癌患者人數(shù)約為女性的8倍。 女性乳腺癌：約12%的新發(fā)乳腺癌與飲酒有關(guān)。2013-2016年，飲酒共導(dǎo)致約11.6萬名女性患乳腺癌。在女性與飲酒相關(guān)的癌癥中，乳腺癌約占75%。 此外，11.1%的結(jié)直腸癌、10.5%的肝癌和7.7%的食管癌，也與飲酒相關(guān)。 無獨(dú)有偶，2018年《Nature》刊登一篇關(guān)于飲酒致癌的研究同樣具有說服力，這篇文章主要研究了乙醛和雙鍵斷裂的關(guān)系，并發(fā)現(xiàn)對(duì)動(dòng)物全身更深遠(yuǎn)的影響。乙醛還能導(dǎo)致染色體重組，最終導(dǎo)致基因組的不穩(wěn)定。而癌癥本質(zhì)上就是一種基因突變帶來的疾病。 相比于以往的相關(guān)研究只限于細(xì)胞系，這次的研究用了小鼠模型，并直接給小鼠注射了5.8g/kg劑量的酒精，實(shí)驗(yàn)中用到了醛脫氫酶基因（醛脫氫酶是酒精代謝的主要酶，也就是解救酶）敲除的小鼠，經(jīng)過比較，酒精處理過后，基因敲除的小鼠確實(shí)在DNA損傷等方面與正常小鼠有差別。文章的最終結(jié)論顯示，非常過量飲酒能夠增加骨髓干細(xì)胞DNA損傷的風(fēng)險(xiǎn)，并增加誘發(fā)癌癥的幾率。而長期過量的飲酒，可能導(dǎo)致相關(guān)癌癥的發(fā)生幾率。 酒精是如何讓人患癌的？ 飲酒幾乎對(duì)全身器官都有傷害 胰腺炎和胃潰瘍 大量飲酒會(huì)刺激胰腺分泌，容易導(dǎo)致急性胰腺炎，胃潰瘍及胃癌發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)也會(huì)增高。 肝臟疾病 大部分酒精在肝臟代謝，長期飲酒可造成酒精性脂肪肝、酒精性肝炎、酒精性肝硬化等疾病，嚴(yán)重者會(huì)伴隨嚴(yán)重腹水、腎功能不全、消化道出血等并發(fā)癥。 心臟病和中風(fēng) 飲酒可使血壓升高，引起心腦血管疾病，增加突發(fā)冠心病、心力衰竭、心臟驟停、中風(fēng)等風(fēng)險(xiǎn)。 癡呆 大量飲酒可能造成慢性酒精中毒，引起酒精中毒性癡呆等。 心理疾病 長期飲酒易影響心理健康，可能表現(xiàn)為焦慮、抑郁，在慢性酒精中毒者中，有6%~20%患者有過自殺行為 性功能障礙 酗酒可能導(dǎo)致性功能障礙，進(jìn)而造成夫妻關(guān)系緊張，家庭關(guān)系破裂等。 此外，酒精具有成癮性，飲酒后人的思維判斷能力下降，發(fā)生工傷事故、暴力行為等的幾率增加。研究證實(shí)，22%的工傷與飲酒有關(guān)，43%打斗受傷者體內(nèi)酒精濃度較高。 《柳葉刀》2018年發(fā)布研究報(bào)告顯示，全球有24億當(dāng)前飲酒者（在過去12個(gè)月內(nèi)飲酒），其中女性約占25%，男性約占39%。 要問如何才能完全避免酒精傷害？答案只有一個(gè)：不喝酒 要想控酒、戒酒，最重要的是學(xué)會(huì)自律，中國《中國膳食指南》建議，成年男女每天攝入酒精不得超過25克和15克。男性每天最大飲酒量是啤酒1000毫升、葡萄酒250毫升、38度白酒1兩半、52度白酒1兩；女性則為啤酒700毫升、葡萄酒200毫升、38度白酒1兩、52度白酒6錢。 本文來源《生命時(shí)報(bào)》柳葉刀、N知乎關(guān)于博濟(jì)醫(yī)藥 臨床研究服務(wù)：博濟(jì)醫(yī)藥擁有一支規(guī)模龐大、專業(yè)成熟的臨床研究隊(duì)伍，可提供包括醫(yī)學(xué)、項(xiàng)目管理、監(jiān)查、稽查、數(shù)據(jù)管理和統(tǒng)計(jì)分析、生物樣本檢測在內(nèi)的臨床試驗(yàn)全流程解決方案。截至2020年，博濟(jì)醫(yī)藥服務(wù)的客戶超1000家，完成800多項(xiàng)臨床試驗(yàn)項(xiàng)目，助力客戶獲得新藥證書60多項(xiàng)、生產(chǎn)批件超過80項(xiàng)。擁有豐富的臨床試驗(yàn)服務(wù)經(jīng)驗(yàn)，服務(wù)項(xiàng)目涵蓋臨床研究各個(gè)領(lǐng)域，在腫瘤、肝病、消化等創(chuàng)新藥領(lǐng)域擁有獨(dú)特的臨床服務(wù)體系。博濟(jì)醫(yī)藥在全國設(shè)有40多個(gè)臨床監(jiān)查網(wǎng)點(diǎn)，與全國近600個(gè)臨床試驗(yàn)機(jī)構(gòu)展開合作，并運(yùn)用ORACLE OC/RDC及CTMS系統(tǒng)，控制臨床數(shù)據(jù)采集的及時(shí)性、管理臨床試驗(yàn)過程的規(guī)范性。

2021年上半年，F(xiàn)DA共批準(zhǔn)27款新藥，其中包括21款新分子實(shí)體藥物，6款生物制品。另外，F(xiàn)DA還批準(zhǔn)了2款細(xì)胞療法。2021年上半年FDA批準(zhǔn)的新藥類型從疾病領(lǐng)域來看，2021年上半年FDA批準(zhǔn)的新藥仍以腫瘤藥居多，占比45%（13/29），神經(jīng)精神（14%，4/29）、遺傳性疾病（10%，3/29）、生殖泌尿系統(tǒng)疾病7%（2/29）、感染性疾病7%（2/29）等領(lǐng)域也分別有新藥獲批。從審評(píng)方式上看，上半年共有20個(gè)（69%）新藥是以“優(yōu)先審評(píng)”的方式獲得FDA批準(zhǔn)上市，包括14款新分子實(shí)體、和6款生物藥。有11個(gè)品種被FDA授予“孤兒藥”資格，占比38%。上半年獲批的新藥中，有9款屬于First-in-class療法，具體品種如下：上半年有10款新藥（34.5%）被FDA授予突破性療法（BTD）資格，包括5個(gè)生物制品，占上半年獲批生物制品的63%。另有5個(gè)獲得BTD資格的是小分子藥物，占到今年獲批小分子藥物的24%。以下為10款突破性療法簡單介紹：特泊替尼（tepotinib）適應(yīng)癥：治療攜帶MET基因第14號(hào)外顯子（MET ex14）跳躍突變的轉(zhuǎn)移性非小細(xì)胞肺癌(NSCLC)成人患者，這類侵襲性肺癌患者通常是老年人，預(yù)后較差。目前臨床迫切需要能夠產(chǎn)生持久抗腫瘤活性的靶向療法以改善這種挑戰(zhàn)性疾病患者的生活。2月3日，德國默克（Merck KGaA）旗下EMD Serono宣布，F(xiàn)DA已加速批準(zhǔn)口服MET抑制劑特泊替尼（tepotinib，EMD 1214063，Tepmetko）上市，用于治療攜帶MET外顯子14（METex14）跳躍變異的轉(zhuǎn)移性非小細(xì)胞肺癌（NSCLC）成人患者。特泊替尼（tepotinib）是全球上市的第一款MET抑制劑（于2020年3月由日本厚生勞動(dòng)省首先批準(zhǔn)上市），F(xiàn)DA批準(zhǔn)的第二款MET抑制（第一款為卡馬替尼）；同時(shí)是FAD批準(zhǔn)的第63個(gè)小分子激酶抑制劑，也是FDA在2021年批準(zhǔn)的第1個(gè)小分子激酶抑制劑。這一批準(zhǔn)基于一項(xiàng)有152名攜帶METex14跳躍變異的晚期或轉(zhuǎn)移性NSCLC患者參與VISION 2期臨床試驗(yàn)，驗(yàn)結(jié)果顯示：替波替尼（tepotinib）在初治和經(jīng)治患者中的總緩解率均達(dá)到43%。初治和經(jīng)治患者的中位緩解持續(xù)時(shí)間（DOR）分別為10.8個(gè)月（95% CI，6.9-NE）和11.1個(gè)月（95% CI，9.5-18.5）。67%的初治患者和75%的經(jīng)治患者的緩解持續(xù)時(shí)間為6個(gè)月以上，30%的初治患者和50%的經(jīng)治患者的緩解持續(xù)時(shí)間為9個(gè)月以上。特泊替尼（tepotinib）是默克內(nèi)部發(fā)現(xiàn)的一種口服MET激酶抑制劑，可強(qiáng)效、高度選擇性抑制由MET（基因）改變——包括MET第14號(hào)外顯子跳躍突變、MET擴(kuò)增或MET蛋白過表達(dá)引起的致癌信號(hào)，具有改善攜帶這些特定MET改變的侵襲性腫瘤患者治療預(yù)后的潛力。除了NSCLC之外，默克也正在積極評(píng)估特泊替尼（tepotinib）聯(lián)合新療法治療其他腫瘤適應(yīng)癥。tepotinib分子結(jié)構(gòu)式umbralisib適應(yīng)癥：用于治療之前至少接受過一種基于抗CD20治療方案的復(fù)發(fā)或難治性邊緣區(qū)淋巴瘤(MZL)成人患者和之前至少接受過三線全身治療的復(fù)發(fā)或難治性濾泡性淋巴瘤(FL)成人患者。Umbralisib由TG公司開發(fā)，是首個(gè)也是唯一一個(gè)獲批上市的每日口服1次的磷酸肌醇3激酶(PI3K ) δ和酪蛋白激酶1 (CK1) ε抑制劑。PI3K-δ在支持細(xì)胞增殖和生存、細(xì)胞分化、細(xì)胞間運(yùn)輸和免疫方面發(fā)揮重要作用，在正常和惡性b細(xì)胞中都有表達(dá)。CK1-ε是一種癌蛋白翻譯調(diào)節(jié)因子，與癌細(xì)胞包括淋巴惡性腫瘤發(fā)病機(jī)制有關(guān)。此前，umbralisib治療MZL適應(yīng)癥曾獲FDA突破性療法認(rèn)定，上市申請(qǐng)也被納入優(yōu)先審評(píng)。umbralisib也被授予治療MZL和FL的孤兒藥認(rèn)定 (ODD)。umbralisib分子結(jié)構(gòu)式MZL和FL適應(yīng)癥的加速獲批是基于一項(xiàng)II期UNITY-NHL (NCT02793583)研究的總緩解率（ORR）數(shù)據(jù)。UNITY-NHL研究是一項(xiàng)開放標(biāo)簽，多中心，雙隊(duì)列研究，2個(gè)隊(duì)列分別招募了69例 MZL患者和117 例FL患者，受試者接受每日口服1次umbralisib（800mg）治療，直至疾病進(jìn)展或不可耐受毒性。研究結(jié)果表明，MZL患者的總緩解率（ORR）為49% ，完全緩解率（CR）為16%，中位緩解持續(xù)時(shí)間（DOR）尚未達(dá)到。FL患者ORR為43%，CR為3.4%，DOR為11.1個(gè)月。lisocabtagene maraleucel適應(yīng)癥：治療成人復(fù)發(fā)或難治性大b細(xì)胞淋巴瘤。2021年2月5日，F(xiàn)DA批準(zhǔn)了lisocabtagene maraleucel用于經(jīng)≥2線全身治療的復(fù)發(fā)/難治性（R/R）大B細(xì)胞淋巴瘤成人患者，包括彌漫性大B細(xì)胞淋巴瘤（DLBCL）、高級(jí)別B細(xì)胞淋巴瘤、原發(fā)性縱隔大B細(xì)胞淋巴瘤和3B級(jí)濾泡性淋巴瘤患者。在192例可評(píng)估療效的患者中，根據(jù)獨(dú)立審查委員會(huì)（IRC）評(píng)估的總體緩解率（ORR）為73％（95％CI：67-80），完全緩解（CR）率為54％（95％CI：47-61）。至第一次緩解的中位時(shí)間為1個(gè)月。在104例達(dá)到CR的患者中，有65％的患者緩解持續(xù)了至少6個(gè)月，62％的患者緩解持續(xù)了至少9個(gè)月。CR患者的估計(jì)中位緩解持續(xù)時(shí)間（DOR）未達(dá)到（95％CI：16.7-NR），部分緩解（PR）患者的估計(jì)中位DOR為1.4個(gè)月（95％CI：1.1-2.2）。 evinacumab適應(yīng)癥：作為其他降脂藥物的輔助療法用于治療成人和12歲以上兒科純合子家族性高膽固醇血癥（HoFH）。Evinacumab是一種靶向血管生成素樣蛋白3 (ANGPTL3) 的全人源IgG4κ型單抗，是一種全新機(jī)制的降脂藥，通過抑制ANGPTL3而間接加速體內(nèi)脂肪的降解。此前已獲得FDA授予的孤兒藥資格，優(yōu)先審評(píng)資格和突破性療法認(rèn)定，是第一個(gè)上市的ANGPTL3抑制劑。HoFH是一種罕見的家族遺傳性脂質(zhì)代謝異常疾病，病因是控制人體清除膽固醇的PCSK9，LDLR或APOB基因在復(fù)制時(shí)產(chǎn)生突變，導(dǎo)致膽固醇無法正常代謝?；颊咄ǔ０殡S著極高的低密度脂蛋白 (LDL-C)水平，通常在青少年期就發(fā)展為嚴(yán)重的心血管疾病，且治療方案有限，常規(guī)的PCSK9抑制劑和其他降脂療法（如他汀類藥物）對(duì)其都沒有顯著療效，此次evinacumab的獲批，可謂是HoFH患者期盼已久的福音。trilaciclib適應(yīng)癥：預(yù)防擴(kuò)散期小細(xì)胞肺癌成人患者因鉑類╱依托泊苷方案或拓?fù)涮婵捣桨富瘜W(xué)治療導(dǎo)致的骨髓抑制。G1 Therapeutics于今年2月底對(duì)外宣布，F(xiàn)DA已批準(zhǔn)Cosela（trilaciclib）注射液，用于廣泛期非小細(xì)胞肺癌（ES-SCLC）成人患者，在接受含鉑/依托泊苷的化療方案或含拓?fù)涮婵档幕煼桨钢敖o藥，以降低化療誘導(dǎo)的骨髓抑制的發(fā)生率。Cosela通過優(yōu)先審查程序獲得批準(zhǔn)，之前已被美國FDA授予突破性藥物資格（BTD）。值得一提的是，Cosela是全球第一款也是唯一一款可降低化療誘導(dǎo)的骨髓抑制發(fā)生率的骨髓保護(hù)療法，能夠?yàn)榻邮芑煹腅S-SCLC患者骨髓起到保護(hù)作用。Cosela的骨髓保護(hù)作用，可降低嚴(yán)重中性粒細(xì)胞減少癥和貧血的發(fā)生率和持續(xù)時(shí)間、減少諸如生長因子和紅細(xì)胞輸注等搶救性干預(yù)措施的需要。紅細(xì)胞輸注等搶救性干預(yù)措施的需要。Trilaciclib結(jié)構(gòu)式 fosdenopterin適應(yīng)癥：用于降低因A型鉬輔因子缺乏（MoCD）導(dǎo)致的死亡風(fēng)險(xiǎn)。Nulibry（fosdenopterin）由BridgeBio子公司Origin Biosciences開發(fā)，是FDA批準(zhǔn)的首款治療該疾病創(chuàng)新療法。A型鉬輔因子缺乏癥是一種罕見的、遺傳代謝性疾病，通常發(fā)病于出生幾日的嬰兒，會(huì)導(dǎo)致頑固性癲癇發(fā)作、腦損傷和死亡。全球共不到150例患者受此疾病影響，患者中位生存時(shí)間為4年。Fosdenopterin是一種底物替代療法，提供了cPMP（環(huán)吡喃單磷酸）的外源性來源，cPMP可轉(zhuǎn)化為鉬嘌呤，而鉬嘌呤又可轉(zhuǎn)化為鉬輔因子，以防止因鉬輔因子缺乏而導(dǎo)致的亞硫酸鹽氧化酶合成減少進(jìn)而導(dǎo)致的毒亞硫酸鹽的積累，從而緩解嬰幼兒A 型MoCD 的中樞神經(jīng)系統(tǒng)癥狀。Nulibry曾獲得FDA授予的優(yōu)先審評(píng)資格、突破性療法認(rèn)定和孤兒藥資格認(rèn)定。fosdenopterin結(jié)構(gòu)式 idecabtagene vicleucel適應(yīng)癥：用于治療復(fù)發(fā)或難治性多發(fā)性骨髓瘤成人患者，這些患者既往經(jīng)過四線及以上包括免疫調(diào)節(jié)劑、蛋白酶體抑制劑和抗CD38單克隆抗體的治療。2021年3月26日，F(xiàn)DA批準(zhǔn)idecabtagene vicleucel治療既往接受≥4線療法（包括免疫調(diào)節(jié)劑、蛋白酶體抑制劑和抗CD38單克隆抗體）的復(fù)發(fā)/難治性多發(fā)性骨髓瘤成人患者。這是FDA批準(zhǔn)的首個(gè)針對(duì)多發(fā)性骨髓瘤的基于細(xì)胞的基因療法。Idecabtagene vicleucel是靶向B細(xì)胞成熟抗原（BCMA）的基因修飾自體嵌合抗原受體（CAR）T細(xì)胞療法，是使用患者自己的T細(xì)胞進(jìn)行定制的，這些T細(xì)胞會(huì)被收集并進(jìn)行基因修飾，然后再注入患者體內(nèi)。一項(xiàng)多中心研究對(duì)127例復(fù)發(fā)/難治性多發(fā)性骨髓瘤患者（既往接受≥3線抗骨髓瘤治療，其中88%的患者既往接受了≥4線治療）評(píng)估了安全性和療效。接受idecabtagene vicleucel（劑量為300-460x106CAR陽性T細(xì)胞）的100例患者進(jìn)行了療效評(píng)估。主要療效指標(biāo)為獨(dú)立評(píng)審委員會(huì)評(píng)估的總體緩解率（ORR）、完全緩解（CR）率和緩解持續(xù)時(shí)間（DOR）。結(jié)果顯示，ORR為72％（95％CI：62％，81％），CR率為28％（95％CI：19％，38％）。據(jù)估計(jì)，達(dá)到CR患者中有65％的患者的CR狀態(tài)持續(xù)了12個(gè)月。dostarlimab適應(yīng)癥：治療此前接受含鉑化療后疾病進(jìn)展，且存在DNA錯(cuò)配修復(fù)缺陷(dMMR)的成人復(fù)發(fā)性或晚期子宮內(nèi)膜癌患者。FDA于4月22日加速批準(zhǔn)GSK抗PD-1抗體Jemperli (dostarlimab)上市，是FDA獲批上市的第7款PD-1，F(xiàn)DA曾授予dostarlimab治療復(fù)發(fā)或晚期dMMR子宮內(nèi)膜癌突破性療法認(rèn)定。Dostarlimab是一款程序性死亡受體-1 (PD-1)阻斷抗體，能夠與PD-1受體結(jié)合，從而阻斷其與PD-L1和PD-L2配體結(jié)合，抑制腫瘤免疫逃逸。dostarlimab最初由AnaptysBio公司發(fā)現(xiàn)，2014年3月TESARO獲得了在全球開發(fā)和商業(yè)化dostarlimab的權(quán)利，2018年12月GSK收購TESARO，將dostarlimab收入囊中。FDA此次加速批準(zhǔn)是基于一項(xiàng)正在進(jìn)行的大型、多中心、非隨機(jī)、多隊(duì)列、開放標(biāo)簽GARNET研究中dMMR子宮內(nèi)膜癌隊(duì)列研究結(jié)果。研究結(jié)果顯示，71例此前接受過含鉑化療后疾病進(jìn)展且存在dMMR復(fù)發(fā)或晚期子宮內(nèi)膜癌患者的ORR（客觀緩解率）為42.3% (95% CI; 30.6-54.6)，包括12.7% 的CR（完全緩解）和29.6%的PR（部分緩解）。這些產(chǎn)生緩解的患者中，有93.3%患者達(dá)到6個(gè)月或以上的DOR（緩解持續(xù)時(shí)間）。amivantamab-vmjw適應(yīng)癥：治療鉑類化療后進(jìn)展的EGFR外顯子20插入突變的轉(zhuǎn)移性非小細(xì)胞肺癌（NSCLC）患者。5月21日，amivantamab-vmjw被FDA批準(zhǔn)用于治療腫瘤細(xì)胞中攜帶EGFR外顯子20插入突變的NSCLC，成為首款獲批用于此類適應(yīng)癥的藥物，同時(shí)Guardant360 CDx檢測也被批準(zhǔn)用作該適應(yīng)癥的伴隨診斷?！熬珳?zhǔn)腫瘤學(xué)的進(jìn)步促進(jìn)了藥物的開發(fā)，使得包括肺癌在內(nèi)的多種癌癥可以根據(jù)生物標(biāo)志物被細(xì)分，為患者提供精準(zhǔn)治療”，F(xiàn)DA腫瘤卓越中心腫瘤學(xué)主任兼FDA藥物評(píng)價(jià)和研究中心副主任Julia Beaver博士在一次新聞發(fā)布會(huì)上表示?！按饲?，攜帶EGFR外顯子20插入突變的NSCLC并沒有標(biāo)準(zhǔn)靶向療法，而此次amivantamab-vmjw獲批后，該適應(yīng)癥患者首次有了合適的靶向治療方案?！?這項(xiàng)1期CHRYSALIS試驗(yàn)（NCT02609776）的數(shù)據(jù)已于2020年世界肺癌大會(huì)上展示，在EGFR外顯子20插入突變的NSCLC患者（n =81）中，amivantamab-vmjw在40%的患者中誘導(dǎo)了客觀緩解，其中47%患者的緩解持續(xù)時(shí)間至少為6個(gè)月，47%的患者在中位隨訪9個(gè)月后仍在接受治療。 總共有3例完全緩解和29例部分緩解，中位緩解持續(xù)時(shí)間為11.1個(gè)月。疾病控制率為48%（n=39），臨床獲益率為74%；8例患者（10%）發(fā)生疾病進(jìn)展。中位無進(jìn)展生存期為8.3個(gè)月，中位總生存期為22.8個(gè)月。 3級(jí)或以上不良事件（AE）的發(fā)生率為16%，嚴(yán)重AE的發(fā)生率為9%；停藥發(fā)生率為4%，劑量減少和治療中斷的發(fā)生率分別為13%和21%。 研究包括劑量遞增隊(duì)列和劑量擴(kuò)展隊(duì)列，其中，對(duì)劑量遞增隊(duì)列中的患者給予2期劑量治療，即體重＜80 kg的患者劑量為1050 mg，≥80 kg的患者劑量為1400 mg。該隊(duì)列中患者在接受鉑類化療后出現(xiàn)了疾病進(jìn)展，對(duì)其中114例患者進(jìn)行了安全性分析，對(duì)81例患者進(jìn)行了3次或以上的療效評(píng)估。主要終點(diǎn)為總緩解率。 基線患者人群統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)表明，大多數(shù)為女性（59%），中位年齡為62歲（范圍：42-84歲）。吸煙者（47%）和非吸煙者（53%）人數(shù)相當(dāng)。所有患者既往都接受過鉑類藥物雙化療，46%的患者接受過免疫治療，25%的患者接受過EGFR酪氨酸激酶抑制劑靶向治療?；颊呒韧委煹闹形粩?shù)為2（范圍：1-7）。 此前FDA于Orbis項(xiàng)目下授予了amivantamab-vmjw優(yōu)先評(píng)審資格和突破性療法認(rèn)定，Orbis由FDA腫瘤卓越中心倡議，有助于多個(gè)國際機(jī)構(gòu)同時(shí)提交和審查腫瘤治療藥物。Amivantamab在中國也于2020年9月獲得了CDE授予的突破性療法資格。目前國內(nèi)開發(fā)EGFR/c-Met雙抗藥物的公司有岸邁生物、貝達(dá)藥業(yè)、嘉和生物。Sotorasib適應(yīng)癥：治療既往至少接受過一次系統(tǒng)治療的攜帶KRAS G12C突變局部晚期或轉(zhuǎn)移性非小細(xì)胞肺癌(NSCLC)患者。Lumakras（sotorasib，AMG 510）由安進(jìn)開發(fā)，是全球首個(gè)獲得批準(zhǔn)的靶向KRAS突變的腫瘤治療藥物。sotorasib結(jié)構(gòu)式FDA的加速批準(zhǔn)是基于一項(xiàng)代號(hào)為CodeBreaK 100的I/II期臨床研究結(jié)果。在既往接受過化療和/或免疫療法疾病進(jìn)展KRAS G12C突變的124例NSCLC患者中，sotorasib達(dá)到36%的客觀緩解率（ORR），其中58%的患者持續(xù)緩解≥6個(gè)月。Sotorasib已于今年1月28 日被CDE納入突破性療法，國內(nèi)已申報(bào)臨床的KRAS G12C抑制劑的企業(yè)除了安進(jìn)外，還包括貝達(dá)藥業(yè)、北京加科思、益方生物、勁方藥業(yè)、勤浩醫(yī)藥、諾華。附表：2021年上半年FDA批準(zhǔn)的新藥